骨髓间充质干细胞亲和肽MMP底物肽复合物的构建及其作为小分子药物载体的初步研究  

作　　者：赵敬湘[1] 杨立平[1] 刘大庆[1] 岳文[1] 裴雪涛[1] 

机构地区：[1]军事医学科学院输血医学研究所,干细胞与再生医学研究室,北京100850

出　　处：《中国科学（C辑）》2009年第7期647-653,共7页Science in China(Series C)

基　　金：国家高技术研究发展计划(批准号:2006AA02A107);国家重点基础研究发展计划(批准号:2005CB522702)资助项目

摘　　要：为了探讨骨髓间充质干细胞亲和肽与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)底物肽复合后作为小分子药物载体的可行性,采用噬菌体肽库技术,用分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,MSCs)筛选噬菌体环七肽库,获得MSCs高亲和性多肽.合成FITC(FITC-CSTNPKVLC,FITC-P1)和生物素(Biotin-CSTNPKVLC,Bio-P1)标记的亲和肽,流式细胞术和ELISA方法检测其与MSCs的亲和性;将DAPI标记的MSC-Bio-P1复合物植入裸鼠肿瘤组织周围,检测复合物在体内的稳定性.将亲和肽与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)特异性底物肽(GPLGIAGQ)连接,合成FITC标记的亲和肽-底物肽复合物(FITC-Ahx-CSTNPKVLCGPLGIAGQ,FITC-P1-P2),通过流式细胞术检测其对MSCs的亲和性,毛细管电泳方法检测MMP对FITC-P1-P2的酶切效果.结果表明,通过噬菌体肽库筛选获得的MSCs亲和肽,在体内外对MSCs均具有良好的亲和性和稳定性;亲和肽与底物肽的复合物(FITC-P1-P2)对MSCs仍有较好的亲和性,并且能够被MMPs酶切.以上研究表明,MSCs亲和肽-MMP底物肽复合物(CSTNPKVLCGP-LGIAGQ,P1-P2)可以作为MSCs与小分子药物相连的连接子,从而对MSCs作为小分子药物(如化学药物)载体的可行性提供了实验依据.

关 键 词：骨髓间充质干细胞 噬菌体肽库 基质金属蛋白酶 

分 类 号：Q26[生物学—细胞生物学]