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机构地区:[1]中南民族大学生命科学学院/生物技术国家民委重点实验室,武汉430074 [2]武汉纽斯特生物技术有限公司,武汉430074
出 处:《华中农业大学学报》2009年第4期390-393,共4页Journal of Huazhong Agricultural University
基 金:国家自然科学基金项目(30600400)资助
摘 要:为建立表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株,将笔者所在实验室构建的表达含前S基因乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的真核表达质粒共转染CHO/dhfr-细胞,通过筛选,获得可表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的重组CHO细胞,然后进行亚克隆,用氨甲喋呤(MTX)加压选择,以ELISA法检测目的蛋白表达量,筛选获得稳定表达目的蛋白的细胞株,并对其进行特性鉴定。最终获得了C10和A10两株稳定高表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株。To establish efficient eukaryotic cell line to express hepatitis B surface antigen carrying pre-S, two kinds of eukaryotic expression vectors: pcHBSPP and psHBSPP were co-transfected into CHO/dhfr-cells. The transfected cells were selected by G-418 and MTX. The expression of target protein was detected by ELISA. The cell lines C10 and A10 stably expressing hepatitis B surface antigen carrying pre-S were established.
关 键 词:中国仓鼠卵巢/dhfr-细胞 二氢叶酸还原酶 转染 G-418 氨甲喋呤 含前S乙肝病毒表面抗原
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