猪2型圆环病毒与O型口蹄疫病毒二联重组鸡痘病毒的构建和筛选  

Construction and selection of recombinant fowlpox vaccines coexpressing ORF2/ORF1 of PCV2 and P1 of O type FMDV

作　　者：秦晓冰[1,2] 金宁一[2] 牛晋国[1,3] 

机构地区：[1]青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109 [2]解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130062 [3]山西省农业科学院畜牧兽医研究所,山西太原030032

出　　处：《中国兽医学报》2009年第8期959-963,共5页Chinese Journal of Veterinary Science

基　　金：国家"863"计化资助项目(2001AA213071-4)

摘　　要：以pUTA2LacZ为真核表达载体,以中国流行株O型口蹄疫病毒(FMDV)NY00株结构蛋白前体P1基因、猪2型圆环病毒内蒙株的衣壳蛋白和复制蛋白基因为目的基因,构建了2个重组质粒作为中间转移质粒,标记为pUTALP1-ORF2和pUTALP1-ORF2ORF1。将这2个重组转移质粒分别酶切鉴定后,与鸡痘病毒野毒(FPV)282E4株共转染鸡胚成纤维细胞。结果显示,重组核酸质粒构建正确,并能进行表达。经5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)加压筛选,挑取单个蚀斑,3次纯化,获得2株重组毒vpUTALP1-ORF2ORF1和vpUTALP1-ORF2。结果表明,这2株重组鸡痘毒在电镜下可形成完整的病毒粒子。Two recombinant transferred plasmids（pUTALP1-ORF2, pUTALP1-ORF2ORF1 ） containing FMDV P1 of O/NY00 and ORF2/ORF1 of PCV2 were respectively constructed with fowlpox viruses transfeeted to a fresh overnight cultures of chick embryo fibroblast（CEF） cells. Two recombinant fowlpox vaccines （vpUTALP1 ORF2, vpUTALP1-ORF2ORF1） were gained through several times selection with BrdU（5 Bromo-2-deoxyribouridine） and purified by single-plaque. The two recombinant fowlpox viruses can be observed clearly under transmission electron microscope.

关 键 词：重组转移质粒 构建 重组鸡痘毒 筛选 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]