核酶转基因载体的构建及在烟草原生质体中对TMV感染的抑制作用  

Construction of a Ribozyme Transgenic Plasmid Vector and Its Inhibition to TMV Infection in Tobacco Protoplasts

作　　者：杨建华[1] 王华林[1] 于善谦[1] 章道道[2] 

机构地区：[1]复旦大学微生物和微生物工程系 [2]复旦大学化学系

出　　处：《复旦学报（自然科学版）》1998年第4期547-550,共4页Journal of Fudan University：Natural Science

基　　金：国家攀登计划资助

摘　　要：设计切割烟草花叶病毒RNA的锤头型核酸Rz－2，分别以pKyLx7和pBin19为载体，构建含Rz－2基因及核酸和底物连接的RzSb－2基因的重组质粒，通过三亲交配将目的基因转入土壤农杆菌中的Ti质粒．重组Ti质粒通过PEG法转化烟草原生质体，同时对转化的原生质体接种TMVc一定时间后以半叶法检测原生质体中病毒的侵染性．结果表明转基因原生质体中TMV侵染性明显低于未转基因的对照，推测病毒在转基因的原生质体中复制受到干扰；且核酸Rz－2（正向）表达后作用最为明显，核酸连底物RzSb－2（正向）与RzSb～2（反向）之间有明显差别．

关 键 词：核酶 烟草花叶病毒 原生质体 转基因载体 

分 类 号：S435.72[农业科学—农业昆虫与害虫防治] Q522[农业科学—植物保护]