棉花脂肪酸脱氢酶FAD2能够实现转基因小鼠n-6脂肪酸的内源性生物合成  

作　　者：陈青[1] 柳青 吴至芳[1] 王宗义[3] 苟克勉[1] 

机构地区：[1]中国农业大学生物学院,农业生物技术国家重点实验室,北京100193 [2]Blackmountain Laboratory, CSIRO Plant Industry, Canberra, Australia [3]中国农业大学,动物科技学院,北京100193

出　　处：《中国科学（C辑）》2009年第8期755-760,共6页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金(批准号:30571332);国家重点基础研究发展计划(批准号:2004CB117500);转基因生物新品种培育重大专项(批准号:2008ZX08008-003);北京市重点学科资助项目

摘　　要：脂肪酸脱氢酶FAD2(fatty acid desaturase-2)是一种将油酸(18:1)脱氢生成亚油酸(18:2n-6)的植物脱氢酶.在前期研究fad2转基因小鼠模型的基础上,本文新构建CMV promoter/fad2cDNA/SV40poly A真核表达载体,通过显微注射技术,生产出转基因小鼠.7只妊娠受体合计移植184枚受精卵,出生63只(34.2%)健康的成年小鼠.PCR和Southern blotting结果显示,有10只小鼠整合了外源基因,总的转基因效率是15.9%(10/63).随后,转基因小鼠与C57BL/6小鼠杂交选育,建立了10个转基因家系.最后,以6周龄的转基因后代同窝雌鼠作为样本(包括转基因阳性和阴性雌鼠),利用微量气相色谱方法,分析了腿部肌肉组织和肝脏组织的多种n-6脂肪酸的百分含量,结果显示,只有1个(10%)家系的转基因小鼠表达了外源基因,能够有效地改变目标脂肪酸的成分.其中肌肉组织中油酸百分含量(8.580±1.232)与野生型小鼠(10.812±1.244)没有区别(P≥0.05);但是,亚油酸的含量(15.653±0.557),明显(P<0.05)高于野生型小鼠(13.168±0.634),相对含量提高了19%;同时,下游的花生四烯酸(20:4n-6)的含量(12.850±1.479)也明显(P<0.01)高于野生型小鼠(6.871±0.665),相对含量更是提高了87%;转基因肝脏组织的亚油酸(15.962±0.552vs15.200±0.170)和花生四烯酸(12.607±0.623vs11.601±0.492)含量也明显高于野生型小鼠组织(P<0.05).本实验表明,植物fad2基因能够有效地促进转基因小鼠自身生物合成n-6脂肪酸.在国际上首次成功地建立了fad2转基因小鼠的表达模型,为相关疾病的研究奠定了基础.

关 键 词：脂肪酸脱氢酶 FAD2 转基因 小鼠 油酸 亚油酸 花生四烯酸 

分 类 号：Q943.2[生物学—植物学]