水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6的表达及其单克隆抗体的特异性分析  

作　　者：吉栩[1] 魏春红[1] 李毅[1] 

机构地区：[1]北京大学生命科学学院,国家植物基因研究中心,北京100871

出　　处：《中国科学（C辑）》2009年第8期761-767,共7页Science in China(Series C)

基　　金：国家高技术研究发展计划(批准号:nyhyzx07-051和2007AA021505);农业部专项基金资助项目

摘　　要：水稻矮缩病毒（RDV）的基因组包含12条双链RNA,其中基因组片段S6编码的非结构蛋白Pns6为该病毒的运动蛋白.在本研究中,在大肠杆菌中表达了N端融合His-tag的重组Pns6蛋白.在低温和低IPTG浓度的诱导后,通过Ni螯合亲和层析进行纯化获得了HisPns6蛋白.稳定性分析表明,HisPns6是一个稳定的蛋白,可耐受37℃下长达24h的处理.纯化的蛋白后续用于单克隆抗体的制备并得到18个杂交瘤细胞株系.使用从感染RDV的水稻叶片中提取的Pns6为样品,以健康水稻总蛋白为对照,通过Western blot法对抗体进行特异性分析,获得了15个阳性抗体.对其进行抗原决定簇分析表明,最敏感的抗原决定簇位于Pns6的C端区域（296~509位氨基酸）.该结果与生物信息学预测分析相吻合.

关 键 词：水稻矮缩病毒 Pns6 表达 单克隆抗体 抗原决定簇 

分 类 号：S435.111[农业科学—农业昆虫与害虫防治]