Hsp70A-RBCS2融合启动子调控PHB合成酶基因在莱茵衣藻中的表达  

作　　者：王潮岗[1] 胡章立[1] 

机构地区：[1]深圳大学生命科学学院,生态与环境研究所,深圳518060

出　　处：《中国科学（C辑）》2009年第8期775-782,共8页Science in China(Series C)

基　　金：深圳市科技计划;广东省自然科学基金(批准号:011743和010492)资助项目

摘　　要：利用Hsp70A-RBCS2融合启动子构建了新型的莱茵衣藻表达载体,并获得了聚-β-羟基丁酸(PHB)合成酶基因(phbC)的衣藻表达载体p105C124和pH105C124.通过"珠磨法"分别将上述两个衣藻表达载体导入细胞壁缺陷的莱茵衣藻CC-849(Chlamydomonas reinhardtii CC-849)中,得到了具有Zeomycin抗性的转基因藻株.Hsp70A-RBCS2启动子介导的外源基因遗传转化效率明显高于RBCS2启动子,Southern杂交结果显示,phbC基因以低拷贝数整合进莱茵衣藻的基因组DNA中.在光照下,Hsp70A-RBCS2融合启动子能够有效调控phbC基因在莱茵衣藻中的转录和翻译,得到的蛋白产物具有PHB合成酶活性,40℃热激诱导可使PHB合成酶的酶活性提高到1.8倍.因此,Hsp70A-RBCS2融合启动子可使phbC基因在莱茵衣藻中实现可诱导的表达,该研究对利用衣藻合成PHB具有重要的学术意义,进一步的研究将通过"共转化"法获得二价或三价的转基因藻,最终实现在转基因藻中合成PHB.

关 键 词：转基因衣藻 phbC基因 Hsp70A-RBCS2启动子 聚-β-羟基丁酸(PHB) 

分 类 号：Q943.2[生物学—植物学]