木聚糖酶基因umxyn10B的克隆与表达研究  

Cloning and Expression of a Novel Xylanase Gene umxyn10B

作　　者：陈春岚[1,2,3] 卢丽玲[1,2] 冯家勋[1,2] 

机构地区：[1]广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530005 [2]广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西南宁530005 [3]贺州学院,广西贺州542800

出　　处：《江西农业大学学报》2009年第4期711-716,共6页Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis

基　　金：国家"863"计划资助项目(2007AA021307)

摘　　要：从富集培养物宏基因组文库中筛选获得1个表达木聚糖酶活性的克隆pXYN12。鉴定分析表明:pXYN12上潜在的木聚糖酶基因umxyn10B大小为999 bp,编码产物与嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophi-lus)的木聚糖酶基因(GenBank索引号AAZ74783)的氨基酸序列有63%的一致性和76%的相似性,属于糖基水解酶家族10的成员。PCR扩增了umxyn10B的含催化功能域编码区的DNA序列并连接到表达载体pET-30a(+)上,构建成表达质粒在大肠杆菌Rosetta(DE3)pLysS中实现了表达,并对表达条件进行研究。One clone pXYN12 expressing activity of xylanase was screened from a metagenomic library derived from enriched culture. In pXYN12, an putivie xylanase gene （umxyn10B） was found and it had 999 base paire. The coding protein of this gene had a maximum similarity with a xylanase （AAZ74783） from Geobacillus stearothermophilus （Identity：63% ; Positive：76% ） , and it belongs to the Glycoside hydrolases family 10. umxyn10B gene was cloned to expression vector pET -30a （ ＋ ） and expressed in the E. Coli Rosetta （DE3）pLysS. The expression condition of recombinant protein was studied.

关 键 词：宏基因组文库 木聚糖酶基因 克隆 表达 

分 类 号：Q539[生物学—生物化学]