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作 者:陈龙[1] 侯彩玲[2] 谭光轩[1] 于美玲[2] 卢龙斗[2] 殷贵鸿
机构地区:[1]河南省周口师范学院生命科学系,河南周口466000 [2]河南师范大学生命科学学院.河南新乡453002 [3]河南省周口市农业科学院,河南周口466001
出 处:《麦类作物学报》2009年第5期747-751,共5页Journal of Triticeae Crops
基 金:河南省重点科技攻关项目(072102120011)
摘 要:为建立通过一次反应能够同时鉴定3个小麦糯性基因(Wx-Al、Wr-BI和Wx-Dl)的多重PCR反应体系,研究了PCR反应组分和循环参数对多重PCR反应结果的影响。结果表明.反应体系中的引物浓度比例和反应的Tm值是多重PCR成功的关键,当引物浓度比例(SSR/MAG267)为1(0.1μmol/L:0.1μmol/L)~1.22(0.11μmol/L:0.09μmol/L)、Tm为58C时,Wx-Al、Wx-Bl、Wx-Dl基因的多重PCR结果最好。该多重PCR方法能快速高效地坚定3个Ⅳr基因,可用于糯麦选育和小麦品质育种的复合分子标记辅助选择。The research PCR and established a of wheat in one reactio studied the influences of PCR components and cyclic parameters on the multiplex muhiplex PCR system to simultaneously identify Wx-Al ,Wx-Bl and Wx-Dl genes n. The result showed that the primers concentration ratio and Tm value were the critical factors to influence effectiveness of multiplex PCR, when the primers concentration (SSR/ MAG267)was 1(0.1 μmol/L: 0.1 /μmol/L)~1. 22(0.11 μmol/L : 0.09 〉mol/L)and Tin=58 C, the outcome of multiplex PCR of Wx- A1 , Wx- B1 and Wa-Dl was the best. The multiplex PCR system identifying three Wx- genes quickly and efficiently simultaneously in one reaction can be used to carry out multiplex molecular marker-assisted selection in breeding waxy wheat cuhivars and quality wheat breeding.
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