利用FRET技术实时研究顺铂诱导的Caspase-9活化  

Using FRET Technique to Investigate Caspae-9 Activation Induced by Cisplatin in Living Cells

作　　者：刘镭[1] 邢达[1] 

机构地区：[1]华南师范大学生物光子学研究院激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室,广东广州510631

出　　处：《激光生物学报》2009年第4期454-457,共4页Acta Laser Biology Sinica

基　　金：国家自然科学基金项目(30870676;30870658);教育部"长江学者与创新团队计划"创新团队项目(IRT0829);广东省自然科学基金项目(7117865)

摘　　要：该研究旨在在活细胞内研究顺铂诱导Caspase-9活化的动态过程。实验样品经顺铂处理后,应用基于FRET原理设计的荧光探针pSCAT-9来检测Capase-9活化的动态过程。结果表明:在顺铂诱导细胞凋亡的后期,可以明显检测到Caspase-9的活化,且其进程快,约30 m in即可完成。研究表明,应用FRET技术,可以在活细胞内实时、直观、可视地研究顺铂诱导的Capase-9活化,从而客观地反映Caspase-9在该凋亡信号通路中的动态行为及时空传递特性。In this study, using fluorescence resonance energy transfer （FRET） technique, the dynamics of Caspase-9 activation were monitored during cisplatin-induced apoptosis in living human lung adenoearcinoma cells （ ASTC-a-1 ）. The recombinant pSCAT-9 probe was used to determine the kinetics of Caspase-9 activation. The results showed that Caspase-9 was activated obviously at the anaphase of cell apoptosis as revealed by a cleavage of the pSCAT-9 probe, and this process was fast, just lasted about 30min. Using FRET technique, we observed the kinetics of Caspase-9 activation for the first time in living cells during cisplatin-induced apoptosis.

关 键 词：顺铂 荧光共振能量转移技术 细胞凋亡 CASPASE-9 

分 类 号：Q225[生物学—细胞生物学]