实时荧光定量PCR检测鸡传染性贫血病毒方法的建立  

作　　者：张太翔[1] 王炳军[2] 凌宗帅[2] 李玉峰[3] 高小博 田国宁[1] 张金玲[1] 韩亮[1] 张丽萍[1] 

机构地区：[1]潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041 [2]济南出入境检验检疫局,山东济南250010 [3]山东农科院家禽所,山东济南250023 [4]北京盈九思科技发展有限公司,北京100029

出　　处：《中国动物检疫》2009年第11期58-60,共3页China Animal Health Inspection

摘　　要：建立了Taqman实时荧光定量PCR方法检测鸡传染性贫血病毒(CAV)。选取CAV病毒的序列设计引物和探针。以梯度稀释的含有CAV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度。2.0×105～2.0×102个拷贝,4个数量级的范围内定量PCR有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为200个拷贝。根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线。该方法具有特异性,对传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、禽白血病病毒和马立克病毒核酸都没有扩增反应。采用实时荧光定量PCR方法检测试验感染鸡的肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、法氏囊、泄殖腔棉拭子等样品,所有检测样品都有"S"型扩增曲线,且荧光信号值高。实时定量PCR检测CAV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义。

关 键 词：鸡传染性贫血 实时荧光定量PCR TAQMAN探针 

分 类 号：S858.31[农业科学—临床兽医学] S852.659.2[农业科学—兽医学]