甘薯RAPD-PCR反应条件的优化  

Optimization of RAPD-PCR Reaction Conditions for Sweet Potato

作　　者：雷剑[1] 杨新笋[1] 

机构地区：[1]湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉430064

出　　处：《湖北农业科学》2009年第10期2343-2346,共4页Hubei Agricultural Sciences

基　　金：国家科技支撑计划项目(2006BAD01A06-2-12)

摘　　要：以徐薯22的基因组DNA作为PCR反应模板,以随机引物进行RAPD-PCR反应,通过设置TaqDNA聚合酶加量、MgCl2浓度、dNTPs浓度、模板DNA加量、引物加量的不同梯度,探索出一套适合甘薯RAPD-PCR的最优反应条件。试验结果表明,最优反应条件为反应体系25.0μL,2.5μL的PCR 10×Buffer、0.15U的Taq DNA聚合酶、3.0 nmol·μL-1的MgCl2、0.6 nmol·μL-1的dNTPs、40 ng的DNA模板、40 ng的RAPD引物。In this paper, CTAB method was used to extract genomic DNA from sweet potato Xushu No.22. High purity DNA was selected as DNA template. Use random primers to run RAPD-PCR reaction. Through setting a gradient concentrations of the Taq DNA polymerase,MgCl2,dNTPs,DNA template and primers, the suitable conditions for RAPD-PCR reaction of sweet potato was obtained： 25.0 μL reaction system which contains 2.5 μL PCR 10×Buffer, 0.15U Taq DNA polymerase; 3.0nmol· μL^-1 MgCl2; 0.6 nmol· μL^-1 dNTPs; 40 ng DNA template and 40ng primer.

关 键 词：甘薯 RAPD—PCR 反应条件 优化 

分 类 号：S531[农业科学—作物学] Q789[生物学—分子生物学]