检索规则说明:AND代表“并且”;OR代表“或者”;NOT代表“不包含”;(注意必须大写,运算符两边需空一格)
检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:袁正杰[1] 张改生[1] 孙瑞[1] 胡俊敏[1] 位明明[1] 张龙雨[1] 李红霞[1] 陈蕊红[1] 牛娜[1] 马守才[1]
机构地区:[1]西北农林科技大学陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心,陕西杨凌712100
出 处:《麦类作物学报》2009年第6期1088-1093,共6页Journal of Triticeae Crops
基 金:国家高技术研究发展计划(863计划)重大专项(No.2009AA101102);陕西省"13115"科技创新工程重大科技专项(No.2007ZDKG-02);国家杨凌农业生物技术育种中心专项(No.99-1A);西北农林科技大学拔尖人才支持计划项目
摘 要:为了确定普通差速离心法提取的小麦线粒体DNA(mtDNA)的纯度,以小麦肌动蛋白β亚基(β-Ac~tin)、1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亚基(RabcL)和细胞色素C氧化酶第三亚基(COXⅢ)基因的片段作为内参标记,依靠聚合酶链式反应(PCR)及琼脂糖凝胶电泳技术,对提取的mtDNA进行了检测。结果表明,普通差速离心法提取的mtDNA中混杂有核DNA和叶绿体DNA(ctDNA)。对提取的mtDNA稀释后再进行内参法检测,结果发现,当mtDNA稀释到DNA原液的300~400倍时,混杂其中的核DNA已达不到PCR反应的敏感度,但mtDNA、ctDNA仍能满足作为PCR反应体系模板的要求。此时,提取到的mtDNA可视为无核DNA污染的细胞质基因组DNA。In this study, the genes β-Actin, RabcL and COXIII were used as the internal reference markers to detect the purity of mitochondrial DNA extracted using differential centrifugation through polymerase chain reaction (PCR) and agarose gel electrophoresis. The result showed that mitochondrial DNA extrac- ted using differential centrifugation contained impurities, which included nuclear and chloroplast DNA (ctDNA). Then the mtDNA was diluted and the purity of the diluted mtDNA was detected using the same method. It was found that the nuclear DNA became undetectable by PCR when the mtDNA was diluted 300-400 times. However, the mtDNA and ctDNA could still be amplified by PCR. The mtDNA obtained in this way could be used as mtDNA without contamination of nuclear DNA.
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在链接到云南高校图书馆文献保障联盟下载...
云南高校图书馆联盟文献共享服务平台 版权所有©
您的IP:216.73.216.145