克氏原螯虾AFLP反应体系的建立  

Establishment of AFLP Reaction System for Procambarus clarkii

作　　者：杨帆[1] 姚琪[2] 刁英[1,3] 郑兴飞[3] 胡中立[3] 舒新亚[4] 

机构地区：[1]重庆文理学院生命科学与技术学院,重庆402168 [2]武汉理工大学资源与环境工程学院,武汉430070 [3]武汉大学生命科学学院,武汉430072 [4]湖北省水产科学研究所,武汉430071

出　　处：《湖北农业科学》2009年第11期2804-2807,共4页Hubei Agricultural Sciences

基　　金：国家科技支撑计划项目(2007BAD37B01)

摘　　要：以克氏原螯虾DNA为材料,对AFLP分析中的基因组酶切时间、选择性扩增中预扩增产物稀释倍数、Mg2+浓度等3个因素进行了比较。结果表明,基因组用EcoRⅠ和MseⅠ双酶切5 h,选择性扩增的PCR反应体系中Mg2+1.5 mmol/L是进行克氏原螯虾AFLP分析的最佳反应条件,能够得到丰富稳定的带纹。而预扩增产物稀释倍数对选择性扩增没有明显影响。该体系的构建为AFLP技术在克氏原螯虾相关研究中的应用奠定了基础。By using genomic DNA of Procambarus clorkii, the time for DNA double enzymes digestion reaction,the dilution multiple for the pre-amplification production and the concentration of Mg2＋ in the selective amplification reactions system were analyzed. The results showed using 5h for double enzymes digestion and Mg2. 1.5 mmol/L were the best for AFLP analysis of P. clarkii. And no change was found when adjusting the dilution multiple for the pre-amplification production. The establishment of the system might lay a foundation for the application of AFLP techniques to the relative research of P. clarkii.

关 键 词：克氏原螯虾(Procambarus clarkii) AFLP 反应体系 

分 类 号：Q953[生物学—动物学]