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机构地区:[1]北京林业大学生物科学与技术学院 林木育种国家工程实验室 林木、花卉遗传育种教育部重点实验室 国家林业局树木花卉育种生物工程重点开放性实验室,北京100083 [2]内蒙古阿拉善盟农牧业局,巴彦浩特750306
出 处:《植物学报》2009年第6期728-734,共7页Chinese Bulletin of Botany
基 金:国家自然科学基金(No.30371148);863计划(No.2006AA10Z182);国家林业局948项目(No.2005-4-34,No.2007-4-02);国家林业局公益林专项经费课题(No.200701017)
摘 要:胡杨(Populus euphratica)是唯一能在沙漠里生长的高大乔木树种,建立其转基因体系可为胡杨抗逆分子机制与应用技术研究提供基本方法。通过研究农杆菌介导的胡杨转GUS基因的技术体系得出以下结论:(1)胡杨再生植株体系,叶片在附加1.0μmol·L-16-BA和5.0μmol·L-1NAA的1/2MS培养基上不定芽诱导率较高;(2)转基因体系,胡杨叶片在含100μmol·L-1乙酰丁香酮的OD600值为0.4-0.6的根癌农杆菌菌液中浸染15分钟,共培养2天,GUS基因转化效率较高;(3)转基因植株抗生素筛选,转GUS基因胡杨叶片用300mg·L-1头孢霉素抑制农杆菌生长,在含9mg·L-1G418的培养基上诱导不定芽以获得转基因的抗性植株。The unique arbor tree species Populus euphratica can grow well in arid desert. We established an Agrobacterium-based transformation system for this species using a GUS gene as the reporter. Shoots of P. euphratica were regenerated from leaves placed on 1/2 MS supplemented with 1.0 μmol·L^-1 6-BA and 5.0 μmol·L^-1 NAA,leaves were infected for 15 min in a solution of A. tumefaciens with 0.4-0.6 OD600 and 100 μmol·L^-1 AS,and then co-cultured for 2 days. A. tumefaciens was inhibited with 300 mg·L^-1 Cef,and transgenic tissues and shoots were selected with 9 mg·L^-1 G418.
分 类 号:Q943.2[生物学—植物学] S792.11[农业科学—林木遗传育种]
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