眼镜蛇毒活性组分抑制内皮细胞生长及其生化机制初探  

Inhibition effect of China cobra venom active factor on endothelial cells and its biochemical mechanism

作　　者：朱柳[1] 余清声[1] 袁牧[1] 刘新艳[1] 王桂平[1] 余红娥[1,2] 楼晓华[3] 滕脉坤[3] 

机构地区：[1]广州医学院药物研究中心,广东广州510182 [2]广东药学院,广东广州510006 [3]中国科学技术大学生命科学院,安徽合肥230026

出　　处：《中国生化药物杂志》2009年第6期361-364,共4页Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(No.980463);卫生部科技基金课题资助项目(No.98-2-349);广州市教育局市属高校科技计划项目(No.1016)

摘　　要：目的探讨中华眼镜蛇毒活性组分（CCVAF）抑制新生牛肺主动脉血管内皮细胞（BAVEC）生长的作用及其生化机制。方法用MTT法测定CCVAF抑制BAVEC的增殖活性,用伊红-考马斯亮蓝法观察细胞骨架,罗丹明-鬼笔环肽荧光探针F-actin骨架蛋白定位,荧光标记流式细胞法测荧光强度表胞内钙离子浓度[Ca^2＋]i及分光光度法测细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）及一氧化氮（NO）的含量。结果CCVAF（0.625-20μg/mL）剂量依赖性地抑制内皮细胞的生长,IC50=2.45μg/mL。CCVAF与BAVEC共同孵育后,引起细胞间连接减少,细胞F-actin分布混乱;细胞上清液中LDH活力及NO的含量及胞内[Ca^2＋]i分别增加。结论CCVAF抑制BAVEC增殖,可能与CCVAF导致细胞骨架改变,LDH及NO分泌量及胞内Ca^2＋浓度增加等生化机制有关。Purpose To study the effect of China cobra venom active factor（CCVAF） from China cobra venom on endothelial cells and its mechanism. Methods MTF experiment was adopted to evaluate the effect of CCVAF on bovine arteria pulmonalis vascular endothelial cells（BAVEC）. The Eosin-Coomassie brillient blue and rhodamine-phalloidin method was used for actin cytoskeleton. Flow cytometry for [Ca^2＋ ]i and spectrophotometry were used for lactate dehydrogenase（LDH） and nitrogen oxide（NO） levels in cell culture supernatant. Results CCVAF（0.625-20 μg/mL） inhibited the proliferation of BAVEC in dose-dependent manner, and IC50 of CCVAF on BAVEC was 2.45μg/mL. After CCVAF and BAVEC coincubation, it was showed that regression of intercellular conjunctions and disorder of F-actin distribution occurred. The content of [ Ca^2＋ ]i, [LDH] and [ NO] increased respectively. Conclusion CCVAF can inhibit BAVEC proliferation and it maybe associated with the change of cytoskeleton and increasing of [Ca^2＋ ]i, [LDH] aod [NO].

关 键 词：蛇毒 中华眼镜蛇毒 内皮 骨架 一氧化氮 

分 类 号：R996.3[医药卫生—毒理学] R285.5[医药卫生—药学]