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作 者:宋红梅[1,2] 杨涛[2] 马健男[2] 王群[2] 张维军[2] 徐青元[2] 杨增岐[1] 吴东来[2]
机构地区:[1]西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001
出 处:《中国预防兽医学报》2009年第12期925-928,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine
基 金:国家863项目(No.2007AA02Z406)
摘 要:为获得蓝舌病病毒(BTV)VP7基因的原核表达蛋白,本实验采用RT-PCR方法扩增出了血清1型BTV的VP7基因,并克隆到原核表达载体pMAL-c2X中,构建了重组质粒pMAL-VP7。将重组质粒转化TB1感受态细胞,以0.5mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白MBP-VP7以可溶形式存在,分子质量约为90ku。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了检测BTV血清抗体的间接ELISA诊断方法,为今后进一步开展BTV诊断研究奠定了基础。In this study, the VP7 gene of serotype 1 bluetongue virus was amplified by RT-PCR and cloned into prokaryotic expression vector pMAL-c2X. The recombinant plasmid was transformed into E. coli TB1 cells and fusion protein (MBP-VPT) produced after induced with 0.5 mmol/L IPTG. The expressed protein was about 90 ku and existed in soluble form. Indirect ELISA was established using purified MBP-VP7 protein as antigen.
分 类 号:S852.65[农业科学—基础兽医学]
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