捻转血矛线虫HLJ株15ES抗原基因的原核表达  

Prokaryotic expression of Haemonchus contortus HLJ strain 15ES antigen gene

作　　者：王倩囡[1] 宋铭忻[1] 韩彩霞[1] 路义鑫[1] 

机构地区：[1]东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030

出　　处：《中国预防兽医学报》2009年第12期982-984,共3页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：东北农业大学科学研究基金;哈尔滨市科技创新人才研究专项资金(2006RFQXN016);十一五黑龙江省重大专项科技攻关计划项目(GA06B202-3);黑龙江省自然科学基金(c200929)

摘　　要：为了对羊源捻转血矛线虫(H.contortus)15ES抗原基因进行原核表达,本研究利用RT-PCR技术从黑龙江省羊源H. contortus成虫总RNA中扩增得到相对分子质量15kuES蛋白基因(H15ES),序列分析表明,其核苷酸序列与国外已发表的15ku排泄分泌抗原基因的同源性为99.78%。将H15ES克隆至pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-32a-H15ES,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达蛋白相对分子质量约为35.2ku。本研究为H. contortus病诊断抗原和保护性抗原的大量制备及H. contortus核酸疫苗的研究奠定了基础。The 15 ku ES antigen gene was amplified by RT-PCR from the total RNA extracted from the Haemonchus contorms. Sequence analysis showed that the gene was 99.78 % identical to the 15 ku ES antigen gene in the GenBank. The H15 ES antigen gene was cloned into prokaryotic expression vector pET-32a（＋） and expressed in E. coil The expression products were detected by SDS-PAGE and confirmed by western blot. The recombinant protein could serve as diagnostic and protective antigen of Haemonchosis.

关 键 词：捻转血矛线虫 排泄分泌抗原 克隆 原核表达 

分 类 号：S852.7[农业科学—基础兽医学]