解偶联蛋白-2基因过表达慢病毒载体的构建  

作　　者：程锐[1] 王春友[1] 刘涛[1] 童强[1] 万赤丹[1] 

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院附属协和医院,武汉430022

出　　处：《山东医药》2009年第42期28-29,共2页Shandong Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30571764)

摘　　要：目的构建解偶联蛋白-2(UCP-2)基因慢病毒表达载体。方法用RT-PCR技术从转基因肥胖小鼠肝脏组织中获得UCP-2基因编码区片段,用In-Fusio技术将PCR产物连接入Age I单酶切后的慢病毒转移质粒体pGC-FU,进行鉴定及序列测定。将构建成功的转移质粒和两种辅助包装原件载体质粒pHelper1.0、Helper2.0(VS-VG元件)共转染293T细胞,包装成慢病毒,浓缩纯化后检测滴度。结果RT-PCR产物经电泳证实成功获取UCP-2基因cDNA克隆,鉴定证实慢病毒转移质粒连接构建正确,病毒包装滴度为2×108TU/ml。结论成功构建了UCP-2基因慢病毒表达载体。

关 键 词：解偶联蛋白-2 慢病毒表达载体 脂肪肝 

分 类 号：R617[医药卫生—外科学]