小麦丛矮病毒NS蛋白基因的克隆及序列分析  

Cloning and Sequencing of the Gene Encoding NS Protein of Wheat Rosette Stunt Virus

作　　者：沈加丽[1] 叶永钧[1] 龚祖埙[1] 

机构地区：[1]中国科学院上海生物化学研究所

出　　处：《生物化学与生物物理学报》1998年第5期515-519,共5页

基　　金：国家自然科学基金

摘　　要：利用与Ｎ蛋白ｍＲＮＡ３′末端顺序相同的２０寡聚核苷酸引物，通过点杂交、限制性内切酶分析从小麦丛矮病毒（ＷＲＳＶ）ｃＤＮＡ文库中筛选到编码Ｎ蛋白基因下游顺序的ｃＤＮＡ克隆。序列分析表明，该ｃＤＮＡ片段含有一编码约４０ｋＤ蛋白的开放读框。将该读框的全长ｃＤＮＡ经ＰＣＲ扩增后，克隆到ｐＧＥＸ－３Ｘ上，在大肠杆菌ＤＥ３中用ＩＰＴＧ诱导表达，经蛋白质印迹鉴定，该基因为小麦丛矮病毒ＮＳ蛋白基因。The cDNA fragment located downstream of the WRSV N protein gene was obtained from the cDNA library of WRSV by hybridization with a 24 nucleotides sequence fragment of the 3′ end of mRNA of the N protein. The cDNA fragment was sequenced and an ORF encoding a 40 kD protein was found. The gene was expressed in E.coli DE3 and was identified by Western blot experiment as the NS gene of WRSV.

关 键 词：小麦丛矮病毒 NS蛋白基因 克隆 序列分析 

分 类 号：S435.121.9[农业科学—农业昆虫与害虫防治] Q78[农业科学—植物保护]