超大分子F_1-ATP酶空间晶体生长预实验  

The Pre-experiment on Space Crystallization of Pig Heart Mitochondrial F_1-ATPase.

作　　者：李生广[1] 杨树长[1] 杜泉 陈宏雷 林治焕[1] 

机构地区：[1]中国科学院生物物理所分子生物学室,北京100101 [2]中国科学技术大学,实习生合肥230026 [3]中国农业大学,实习生北京100094

出　　处：《航天医学与医学工程》1998年第5期343-346,共4页Space Medicine & Medical Engineering

基　　金：国家空间应用计划基金 ;国家自然科学基金 (基金号 :396 70 183);北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室基金支持

摘　　要：ATP合成酶 (质子ATP酶 )是氧化磷酸化过程中催化ATP合成的关键酶。具有催化活性的F1 -ATP酶部分高分辨率三维结构的解析 ,对阐明氧化磷酸化的机理具有重要意义。作为三维结构研究的基础 ,获得高质量的蛋白晶体是必需的。为提高空间实验的成功率 ,在实验过程中 ,分别采用悬滴和坐滴气相扩散法进行F1 -ATP酶晶体生长。针对预定的空间蛋白质结晶实验的条件要求。本实验对原有的F1 提取、纯化及结晶条件的优化进行改进尝试 ,找到了可在 5d内长出单晶的条件 ,并达到较好的实验重复性。ATP synthase (H +-ATPase) plays a key role in oxidative phosphorylation. Its catalytic moiety F 1-ATPase is under intense structural study because of different crystallographic results and diverse hypotheses of its catalytic mechanism.To obtain high quality crystals,F 1-ATPase sample is going to be carried to outer space by recovable satellite for crystal growth under microgravity.And to make it suitable for space crystal growth,F 1-ATPase was purified from pig heart and the conditions were optimized for its maintenance,transportation,and crystallization.By using hanging drop vapor diffusion method and sitting drop vapor diffusion method,the crystals were obtained within 5 d and with a size of 0.1mm×0.1mm×0.1mm on the 7th day.The reproducibility of these experiments is also good.

关 键 词：提纯 F1-ATP酶 合成酶 晶体生长 

分 类 号：Q559.02[生物学—生物化学]