改变PTEN基因表达影响支气管平滑肌细胞增殖  

作　　者：张达成 罗雅玲[1] 赖文岩[2] 钟浩海[1] 陈丽丽[1] 

机构地区：[1]南方医科大学南方医院呼吸内科,广东广州510515 [2]南方医科大学南方医院心内科实验室,广东广州510515

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2010年第1期73-76,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(7005157);国家自然科学基金资助项目(30770936)

摘　　要：目的:通过基因过表达和RNA干扰(RNAi)技术改变PTEN基因的表达并观察其对人支气管平滑肌细胞(BSMC)增殖和相关信号通路的影响。方法:利用携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-GFP-PTEN)和针对PTEN基因的腺病毒短发夹状RNA(shRNA)载体(Ad-GFP-shRNA-PTEN),转染BSMC细胞,建立PTEN基因过表达细胞模型Ad-GFP-PTEN-BSMC和PTEN基因沉默细胞模型Ad-GFP-shPTEN-BSMC,并以感染Ad-GFP和空白组作为对照。通过荧光倒置显微镜检测转染效率;Westernblot法检测PTEN蛋白的表达和AKT、ERK1/2通路的活化情况;MTS/PMS法检测细胞生长的变化;PI单染流式细胞术检测细胞周期的变化。结果:腺病毒介导的过表达载体和shRNA载体都能有效改变PTEN基因的表达。PTEN基因表达上调后,BSMC细胞生长受到抑制,G0-G1期细胞增多,S期细胞和G2/M期细胞减少,PI3K/AKT通路受到抑制,而MAPK/ERK通路未见变化;PTEN基因表达下调后,BSMC细胞生长受到促进,S期细胞增多,G0-G1期细胞和G2/M期细胞减少,PI3K/AKT通路激活,但MAPK/ERK通路却受到抑制。结论:PTEN基因可能主要通过调节PI3K/AKT通路影响人支气管平滑肌细胞的生长。

关 键 词：腺病毒载体 RNA干扰 PTEN 支气管平滑肌细胞 细胞增殖 AKT ERK1/2 

分 类 号：R562.25[医药卫生—呼吸系统]