CD59配体肽真核表达系统的构建及对PC-3细胞活性的作用研究  

作　　者：李伟伟[1] 高美华[1] 张蓓[1] 解西河[1] 

机构地区：[1]青岛大学医学院免疫学教研室,山东青岛266071

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2010年第1期80-83,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30170893)

摘　　要：目的:构建CD59分子配体肽sp22基因重组真核表达系统,探讨sp22基因对CD59分子的影响。方法:构建含特异性sp22基因的真核重组表达载体sp-pIRES,脂质体法转染人前列腺癌PC-3细胞,G418筛选建立稳定转染细胞系,RT-PCR检测转染细胞中sp22基因mRNA的表达筛选阳性细胞克隆,Western blot、ELISA竞争抑制试验检测转染细胞CD59蛋白的表达;台盼蓝染色实验和LDH实验测sp22基因对CD59分子功能的影响。结果:PCR、酶切及DNA测序鉴定表明成功构建了sp-PIRES重组表达载体;RT-PCR试验证实sp22在spPC-3细胞中成功表达;Westernblot、ELESA竞争抑制试验表明:spPC-3细胞比正常PC-3细胞CD59蛋白表达减少(P<0.05);与正常PC-3细胞相比,补体对spPC-3细胞的溶解杀伤明显增强(P<0.05)。结论:sp22基因可在mR-NA及蛋白水平影响人前列腺癌PC-3细胞表面CD59抗原的表达及功能,降低CD59分子抗补体活性,有望用于肿瘤治疗。

关 键 词：CD59 配体肽 RT-PCR PC-3细胞 补体 

分 类 号：R392.12[医药卫生—免疫学]