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作 者:高飞[1,2] 高利[2] 刘太国[2] 高继国[1] 陈万权[2]
机构地区:[1]东北农业大学生命科学学院,哈尔滨150030 [2]中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193
出 处:《植物保护》2010年第1期42-46,54,共6页Plant Protection
基 金:国家“973”计划课题(2009CB119200);国家科技支撑计划课题(2006BAD08A14);国家“863”课题(2006AA10Z432);农业部农作物病虫害监测与防治专项(2130108)
摘 要:以小麦矮腥黑粉菌(Tilletia controversa Kühn)及其近缘种小麦网腥黑粉菌[T.caries(DC.)Tul.]、小麦光腥黑粉菌(T.laevis Kühn)和其他6种黑粉菌的DNA为模板,用RNA聚合酶II的第2亚基RPB2基因的通用引物RPB2-740F/RPB2-1365R进行PCR扩增。结果表明,3种小麦腥黑粉菌均能扩增出617 bp大小的DNA片段,供试的其他6种黑粉菌没有任何扩增产物。利用DNAMAN软件进行序列分析结果表明,3种小麦腥黑粉菌的RPB2蛋白基因序列的相似性为99.08%,存在17个碱基的差异。利用RPB2基因的通用引物作为小麦腥黑粉菌的内置对照引物,与小麦矮腥黑粉菌的特异引物CQUTCK2/CQUTCK3相结合可提高小麦矮腥黑粉菌检测的准确性。The genomic DNA of Tilletia controversa Kuehn (TCK) and its related species, T. caries (DC.) Tul. (TCT), T. laevis K/ihn (TLK) and the smut pathogens Ustilago spp., Sporisorium spp. and T. horrida were amplified with the universal primers of RPB2 gene, RPB2-740F/RPB2-1365R. A 617 bp fragment was amplified from three Tilletia species on wheat but not from Ustilago spp., T. horrida and Sporisorium spp. The similarity of the three Tilletia species was 99.08%, with 17 different bases, based on the analysis by DNAMAN. The RPB2 gene primers, as internal control primers, combined with TCK specific primers CQUTCK2/CQUTCK3 could improve the accuracy of TCK molecular detection by PCR amplification.
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