核心蛋白聚糖抑制转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化机制研究  

Mechanisms of decorin inhibiting epithelial-to-mesenchymal transition induced by transforming growth factor β1 in renal tubular epithelial cells

作　　者：王进雅[1] 鲍华英[2] 黄松明[2] 张爱华[2] 潘晓勤[3] 费莉[3] 陈荣华[3] 

机构地区：[1]南京医科大学第二附属医院儿内科,210003 [2]南京医科大学附属南京市儿童医院肾脏内科 [3]南京医科大学儿科医学研究所

出　　处：《中华儿科杂志》2010年第1期50-54,共5页Chinese Journal of Pediatrics

基　　金：南京市科技局人才培养项目（200306062）

摘　　要：目的研究核心蛋白聚糖抑制转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞．间充质细胞-转分化（EMT）的机制。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2）分为4组：（1）阴性对照组；（2）100ng／ml核心蛋白聚糖组；（3）10ng/ml TGF-β1组；（4）100ng/ml核心蛋白聚糖和10ng／mlTGF-β1组。Westernblot法检测信号通路ERK、P13K、Smad3的磷酸化水平和β-catenin的蛋白水平；实时定量-PCR检测snailmRNA的表达情况，逆转录-PCR检测淋巴细胞增长因子1（LEF-1）mRNA的表达情况。结果（1）与对照组相比，TGF-β1诱导组ERK（1．11±0．09：0．47±0．07）、P13K（14．79±1．02：2．48±0．06）、Smad，（0．95±0．02：0．08±0．01）的磷酸化水平明显增高，snail（2．59±0．70：1．02±0．13）、LEF-1（1．85±0．08：0．30±0．11）的mRNA的表达鼍明显增高，β—catenin（1．46±0．20：0．49±0．05）的量明显增高；（2）单纯核心蛋白聚糖组与对照组相比，所得结果差异均无统计学意义。核心蛋白聚糖和TGF—β1共同刺激组与TGF-β1组相比，ERK（0．58±0．08）的磷酸化水平及snailmRNA（1．24±0．03）的表达量明显降低而PI3K（15．84±01．64），Smad，（0．90±0．04）的磷酸化水平，LEF—1的mRNA（1．64±0．07）、β-catenin（1．42±0．09）的量差异无统计学意义。结论核心蛋白聚糖抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞EMT可能是通过阻止ERK信号转导通路实现的。Objective To investigate the mechanisms of decorin inhibiting epithelial-tomesenehymal transition （EMT） induced by transforming growth factor β1 （TGF-β1） in renal tubular epithelial cells. Method HK-2 cells in vitro were divided into 4 groups ： （ 1 ） negative control group ; （2） decorin group, added with decofin 100 ng/ml ; （3） TGF-β1 group, added with TGF-β1 10 ng/ml; （4） deeorin and TGF-β1 group, added with decofin 100 ng/ml and TGF-β1 10 ng/ml. The protein level of phosphor-ERK, phosphor- PI3K , phosphor- Smad3 and β-eatenin was detected by Western blotting method. The snail mRNA level was tested by real time-PCR, while the lymphoid enhancer factor-1 （ LEF-1 ） mRNA level was measured by RT-PCR. Results The snail （ 2. 59 ± 0. 70：1.02 ± 0. 13 ） and LEF-1 mRNA （ 1.85 - 0. 08： 0. 30±0. 11 ） were significantly up-regulated, meanwhile the protein level of phosphor-ERK（ 1.11 ± 0. 09： 0. 47 ± 0. 07 ）, phosphor-PI3 K （ 14. 79 ± 1.02：2.48 ± 0. 06 ）, phosphor-Smad3 （ 0. 95 ± 0. 02 ： 0. 08 ± 0. 01 ） and β-catenin（ 1.46 ± 0. 20： 0. 49 ± 0. 05 ） were significantly increased in TGF-β1 group compared to control group, while there were no statistically significant difference in all figures between control group and deeorin group. The phosphor-ERK protein level （ 0. 58 ± 0. 08 ） and the snail mRNA level （ 1.24 ± 0. 03 ） were significantly down-regulated in TGF-β1 and decorin group compared to TGF-β1 group, however there were no statistically significant differences in the level of phosphor-PI3K （ 15.84 ± 1.64 ） , phosphor-Smad3 （0. 90 ± 0. 04 ） and β-catenin （ 1.42 ± 0. 09 ） between these two groups. Conclusion Decorin inhibited EMT induced by TGF-β1 which may be through blocking the ERK signal transduction pathway.

关 键 词：蛋白聚糖类 分化抑制蛋白质类 纤维化 肾脏病学 转化生长因子Β1 

分 类 号：R692[医药卫生—泌尿科学]