阿留申病毒强致病性毒株非结构蛋白基因的克隆及序列分析  

Cloning and Sequence Analysis of NS Gene of Highly Pathogenice Aleutian Virus Strains

作　　者：张瑞[1] 李艳伍[2] 许兰菊[1] 贾赟[2] 蒋大伟[1] 张秀云[3] 李炜[1] 宋海霞[1] 

机构地区：[1]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002 [2]辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001 [3]大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连116034

出　　处：《中国动物检疫》2010年第2期27-31,共5页China Animal Health Inspection

摘　　要：根据Genbank公布的全基因序列设计两对引物,利用PCR扩增技术,得到阿留申病毒非结构蛋白基因ADV-LN1、ADV-LN2,将其克隆至pMD18-T载体中进行序列测定,并与其它国内外毒株的非结构蛋白进行序列比较和分析。序列分析表明,同国外毒株相比核苷酸序列同源率NS1为87.8%～99.1%,NS2为87.7%～98.5%,NS3为85.4%～99.2%;氨基酸序列同源率NS1为82.5%～98.0%,NS2为81.6%～96.5%,NS3为78.2%～98.9%;与国内毒株相比核苷酸序列同源率NS1为91.5%～93.8%,NS2为93.0%～94.7%,NS3为93.5%～96.6%;氨基酸序列同源率NS1为87.4%～89.9%,NS2为87.7%～90.4%,NS3为88.5%～94.3%。系统进化树分析表明:国内流行毒株之间与欧美毒株之间,差异逐渐缩小,遗传变异趋势更加复杂。Objective; To compare the effects of two methods for purifying the rabbit-anti-sheep Mycoplasma pneumonia IgG. Method： Separate and purify the rabbit-anti-sheep Mycoplasma pneumonia IgG using saturated ammonium sulfate （AS） method and caprylic acid-ammonium sulfate （CA-AS） method respectively, and then test the relative molecular weight, protein content and immune activity by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis （SDS-PAGE）, spectrophotometer and agar gel precipitation （AGP） assay, Results： Protein content of purified antibody is almost the same with the two methods; the purity and titer with CA-AS method are both higher than that with AS method.Conclosion The eaprylic acid-ammonium sulfate method is a simple, rapid and efficient method for antibody purification

关 键 词：阿留申病毒 非结构蛋白 克隆 序列分析 

分 类 号：S852.659.2[农业科学—基础兽医学]