通过双重PCR方法区分坏死梭杆菌亚种  

Differentiation of Fusobacterium necrophorum Subspecies by Duplex PCR

作　　者：姚志利[1] 刘晓颖[1] 陈立志[1] 冯凯 王燕[1] 刘振铸 李玉文 

机构地区：[1]中国农业科学院特产研究所,吉林吉林132109 [2]长春市双阳区农业综合执法大队,吉林长春130600 [3]唐山市汉沽管理区动物卫生监督所,河北唐山301501

出　　处：《特产研究》2010年第1期15-18,共4页Special Wild Economic Animal and Plant Research

基　　金："十五"国家科技攻关子课题(2002BA518A04);吉林省科技发展计划项目(20070570);吉林市科技发展计划项目(200805)

摘　　要：基于已发表的坏死梭杆菌白细胞毒素启动子区序列,设计3条特异性引物L7、L8和L9。L7和L8分别与Fnn和Fnf的特异性序列结合,L9与两个亚种序列相匹配。分别扩增出1 076bp和809bp的特异性片段。试验结果表明,这些引物具有高度的特异性和敏感性,能够检测坏死梭杆菌基因组DNA的最小量为10pg/μL,建立的双重PCR体系可用于区分坏死梭杆菌亚种。Thee pairs of specific： primers （L7, L8 and L9 ）were designed based on the published leukntoxin gene sequences of Fusobacterium necrophorum. L7 and Lg targeting Fnn and Fnf, respectively;L9 targeting both subspecies. Fnn and Fnf amplify 1 076 bp and 809 bp fragments respectively. Experimental results showed that these primers possessed a high specificity and sensitivity,we can detect genome DNA 20 pg/Q74 L. These results sugguest that duplex PCR can be used as a new tool for the differentiation of Fusobacterium necrophorum subspecies.

关 键 词：坏死梭杆菌 双重PCR 白细胞毒素 

分 类 号：Q939.122[生物学—微生物学] Q74