用正交设计法优化枣树ISSR-PCR反应体系  

Optimization for ISSR reaction system of jujube tree by orthogonal design

作　　者：原勤勤[1] 文亚峰[1] 何钢[1] 刘儒[1] 

机构地区：[1]中南林业科技大学,湖南长沙410004

出　　处：《中南林业科技大学学报》2010年第2期70-74,共5页Journal of Central South University of Forestry & Technology

基　　金：湖南省自然科学基金项目(06JJ20022);林业科技支撑计划项目子专题(2006BAD01A17;2006BAD18B02)

摘　　要：采用正交设计的方法对枣ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用DPS数据处理软件分析。实验结果表明:各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中Mg2+影响最大;筛选出了各反应因素的最佳水平,建立枣ISSR-PCR的最佳反应体系(25μL)为:Taq酶1.0 U、Mg2+1.0 mmol/L模板DNA 1.0μL、dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.3μmol/L。Using the orthogonal design to optimize ISSR-PCR amplification system on jujube in four levels of five factors （Taq DNA polymerase, Mg^2＋, DNA template,dNTP, and primer）respectively. PCR result showed that each factor in different levels has significant effect on the result of PCR, the most remarkable factor was the quantity of Taq DNA polymerase. The optimum level of ISSR PCR system for jujube was established . The total reaction system was 25μL and contained 1.0U Taq DNA polymerase, 1.0 mmol/L Mg^2＋, 1. 0 μL DNA template, 0. 25 mmol/L dNTPs and 0.3 /mmol/L Primer.

关 键 词：枣树 分子标记 ISSR-PCR 反应体系 正交设计 

分 类 号：S665.1[农业科学—果树学]