人CD4^+T淋巴细胞活化相关miRNA的筛选及其靶分子鉴定  

作　　者：薛茜[1] 郭张燕[1] 李伟[1] 王涛[1] 孟艳玲[1] 杨安钢[1] 

机构地区：[1]第四军医大学基础部免疫学教研室,陕西西安710032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2010年第2期181-183,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2004CB518805);教育部"长江学者和创新团队发展计划"资助项目(IRT0459)

摘　　要：目的:筛选与CD4+T淋巴细胞活化相关的miR-NA,确定其靶分子。方法:用抗CD3的单克隆抗体(mAb)和抗CD28的mAb诱导Jurkat细胞活化,利用miRNA芯片检测并筛选出活化前后表达丰度有显著变化的microRNA,用定量RT-PCR证实筛选出的miRNA在Jurkat细胞活化的差异表达。设计引物构建miRNA的表达载体。利用生物信息学软件预测miRNA的靶分子,将靶分子mRNA的3′UTR克隆入pGL3Luciferase报告基因载体中。观察转染的miRNA对报告基因表达的影响。结果:流式细胞术(FCM)证实了抗CD3的mAb和抗CD28的mAb可以诱导Jurkat细胞的活化。经miRNA芯片检测表明,Jurkat细胞活化前后有5种miRNA表达水平明显下降,定量RT-PCR证实了miRNA芯片的结果。成功构建了部分预测靶分子的荧光素酶报告基因载体。双荧光素酶报告系统检测了miR-181c对靶分子的干扰作用。结论:miR-181c与人CD4+T淋巴细胞的活化有着密切的关系,CD69可能是miR-181c的一个靶分子。

关 键 词：MIRNA T淋巴细胞 活化 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]