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机构地区:[1]华中师范大学生命科学学院昆虫学研究所,湖北武汉430079
出 处:《化学与生物工程》2010年第3期67-69,共3页Chemistry & Bioengineering
摘 要:采用PCR方法扩增出人类博卡病毒结构蛋白基因VP2,通过双酶切、连接、转化等方法将VP2基因克隆到原核表达载体pMAL-c2x上,构建重组质粒pMAL-c2x-VP2,通过双酶切检测重组质粒构建成功;用0.8 mmol.L-1IPTG诱导融合蛋白表达,经SDS-PAGE检测、Western Blot分析,证明目的蛋白得到了表达。可为目的蛋白的纯化及结构和功能的研究、相应抗体的制备打下坚实的基础。In this report, human bocavirus structural gene VP2 was amplied by using PCR approach, and the PCR product was cloned into the prokaryotic expression vector pMAL-c2x to generate the recombinant plasmid pMAL-c2x-VP2 and expressed in Escherichia coli DHSa strain. The maximal expression level of the fusion protein was reached with the induction of 0.8 mmol · L^-1 IPTG at 37℃ for 4 hours. The fusion protein was identified as target protein by Western Blot analysis with MBP-tag antibody. The purified protein provides an useful tool for the studies of its function.
分 类 号:R373.1[医药卫生—病原生物学]
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