芥蓝RAPD反应体系的建立  

The Establishment of RAPD Reaction Program of Chinese Kale

作　　者：陈文文[1] 刘厚诚[1] 陈日远[1] 宋世威[1] 孙光闻[1] 

机构地区：[1]华南农业大学园艺学院,广州510642

出　　处：《中国农学通报》2010年第6期22-25,共4页Chinese Agricultural Science Bulletin

基　　金：国家科技部星火计划项目"蔬菜高效可持续生产技术体系建立与示范推广"(2008GA781001);广东省产学研重大项目"外向型设施蔬菜周年生产与产业化示范"(cgzhzd0809)

摘　　要：利用改良的CTAB方法从芥蓝叶片中提取高质量的DNA。在参考一般RAPD分析反应程序的基础上,经过优化试验,确定适合芥蓝PCR扩增体系(总体积25μL)为:25mmol/LMgCl22.0μL、10×PCR Buffer2.5μL、2.5mmol/LdNTPs2.0μL、5U/μLTaq酶0.25μL、5μmol/L引物1.2μL、模板DNA25ng、灭菌双蒸水12.25 μL。PCR扩增程序为:94 ℃预变性5 min,94℃变性1 min,36 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40个循环,72 ℃延伸10 min。High quality DNA was obtained from Chinese Kale （Brassiea alboglabra Bailey） leaf by the improved method of CTAB. Based on the common RAPD reaction program and the adjusting experiments, the optimal PCR system （25 μ L total volumes）contains： 5 mmol/LMgC12 2.0μ L, 10× PCR Buffer 2.5 μ L, 2.5 mmol/L dNTPs2.0 μ L, 5U/μ L Taq DNA polymerase 0.25μ L, 5 μ mol/L primerl.2 μ L, genomic DNA 25ng and ddH2O 12.25μ L. The optimal amplification program as follows： 94℃ for 5 min; 40 cycles at 94℃ for 1 rain, 36℃ for 1 rain and 72℃ for 2 rain; 72℃ for 10 min at last. ：

关 键 词：芥蓝 模板DNA RAPD 

分 类 号：S635.9[农业科学—蔬菜学]