双链荧光核酸适体探针用于蛋白质的简便快速检测  

Simple Method of Protein Detection Based on Double-stranded Fluorescent Aptamer Probe

作　　者：郭秋平[1] 羊小海[1] 王柯敏[1] 孟祥贤[1] 李军[1] 仲志鸿[1] 

机构地区：[1]湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室,化学化工学院,生物医学工程中心,生命科学与技术研究院,生物纳米与分子工程湖南省重点实验室,长沙410082

出　　处：《高等学校化学学报》2010年第2期274-278,共5页Chemical Journal of Chinese Universities

基　　金：国家“九七三”计划项目(批准号:2002CB513110);科技部国际合作重点项目(批准号:2003DF000039);国家自然科学基金(批准号:90606003,20805012);湖南省杰出青年科学基金(批准号:08JJ1002)资助

摘　　要：发展了一种基于双链荧光核酸适体（F-Aptamer）探针的简单快速检测蛋白质的分析方法.该双链荧光Aptamer探针由一条带荧光标记的Aptamer探针和带猝灭标记的互补DNA组成,当靶蛋白存在时,能形成比双链荧光Aptamer探针更稳定的F-Aptamer/蛋白质复合物,并发出荧光,从而实现对蛋白质的简便快速检测,检测线性范围为6~100 nmol/L,检出限为6 nmol/L.该方法设计简单,对核酸适体分子的大小和空间结构没有要求,可作为一种通用的基于F-Aptamer识别机理的蛋白质检测方法.A simple method of protein detection was developed using a double-stranded fluorescent aptamer probe.This double-stranded aptamer probe consisted of an aptamer probe labeled with a fluorophore and a short complementary oligonucleotide labeled with a quencher.In the presence of protein,the double-stranded aptamer probe dissociated and F-aptamer/protein complex was formed,leading to fluorescence restoring.Then protein detection was carried out by monitoring fluorescence enhancement,with a liner range of 6—100 nmol/L and detection limit of 6 nmol/L.This design strategy is easy to generalize for any aptamer without prior knowledge of its secondary or tertiary structure,and would be used as a simple and general tool for protein detection.

关 键 词：核酸适体 蛋白质检测 凝血酶 

分 类 号：O657[理学—分析化学] O629.73[理学—化学]