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作 者:毛三英[1] 郭霄峰[1] 何敏[2] 马勇江[1] 范小龙[1] 剡海阔[1] 马红娜[1] 邓衔柏[1]
机构地区:[1]华南农业大学兽医学院,广东广州510642 [2]广东科贸职业学院,广东广州510430
出 处:《中国兽医杂志》2010年第3期18-21,共4页Chinese Journal of Veterinary Medicine
基 金:国家自然科学基金项目(30671565)
摘 要:本研究以原核表达的融合型的重组蛋白pET32a(+)-P(狂犬病病毒HepFlury株P蛋白)免疫6-8周龄的BALB/c小鼠,取脾细胞和SP2/0按常规杂交瘤技术进行细胞融合,经间接免疫荧光方法(IFA)筛选及对mAb进行初步鉴定。经3次亚克隆后获得1株稳定分泌表达的杂交瘤细胞株5G8。The fusion protein(pET32a(+)-P)was purified by TrapFF crude,6-8-week-old BALB/c mice were immunized with the protein mixed with adjuvants before the splenic cells of immunized mice were fused with SP2/0 myeloma cells.Indirect fluorescence antibody detection assay was used to screen hybridoma cells for the specific monoclonal antibodies.One hybridoma(5G8) producing monoclonal antibody were obtained after three rounds of subcloning.
关 键 词:重组蛋白pET32a(+)-P 细胞融合 间接免疫荧光方法(IFA) MAB
分 类 号:S852.659.5[农业科学—基础兽医学]
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