人外周血中NF-κB p65定量检测方法的建立及临床应用  

作　　者：林青[1] 郑健[2] 陈宇新[1] 艾斯[2] 王芳[1] 林礼兴[1] 

机构地区：[1]福建中医学院附属人民医院检验科,福州350004 [2]福建中医学院附属人民医院儿科,福州350004

出　　处：《第三军医大学学报》2010年第7期728-730,共3页Journal of Third Military Medical University

基　　金：福建省自然科学基金(C0740002;C0440015);福建中医学院课题(XB2006011)

摘　　要：目的建立一种能定量测定人外周血中核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)p65活化量的检测方法。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,从细胞核成分中提取核蛋白,应用Bradford法进行核蛋白定量,以识别NF-κB p65不同抗原表位的2种抗NF-κB单克隆抗体为基础,建立可定量检测人外周血NF-κBp65活化量水平的双抗体夹心酶联免疫吸附实验法。应用已建立的NF-κB p65定量检测方法测定了68例微小病变型肾病综合征患者和20名健康人外周血中NF-κB p65活化量。结果本方法批内、批间变异系数分别为(9.78±3.99)%、(12.51±4.53)%,灵敏度为0.030mg/L,平均回收率为95.8%。与NF-κB突变型寡核苷酸不发生交叉反应。微小病变型肾病综合征患者治疗前外周血中NF-κB p65活化量较健康人显著增高(P<0.01),治疗后与治疗前NF-κB p65活化量差异有统计学意义(P<0.01),但与健康人NF-κB p65活化量差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究建立的人外周血中NF-κB p65活化量定量检测方法快速、特异且可靠,为临床监测NF-κB p65活化情况提供了条件。

关 键 词：NF-κB p65亚基 单个核细胞 酶联免疫吸附测定 微小病变型肾病综合征 

分 类 号：R446.11[医药卫生—诊断学] R446.6[医药卫生—临床医学]