PRRSV HN25株ORF5基因的克隆和重组腺病毒的构建  

作　　者：于新友 沈志强[1,2] 管宇[2] 南松剑[2] 王金良[2] 肖跃强[2] 唐娜[2] 

机构地区：[1]山东省畜禽用蜂胶疫苗工程技术研究中心,山东滨州256600 [2]山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600

出　　处：《畜牧与兽医》2010年第1期61-63,共3页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：山东省自然科学基金项目(Y2006D26)

摘　　要：克隆PRRSV HN25株ORF5基因,测序并进行序列分析。结果显示ORF5基因编码区长603bp,编码200个氨基酸,与国内外VR-2332株、LV株和CH-1a株ORF5基因的核酸序列同源性分别为99.0%,63.8%和91.4%,而推导的氨基酸序列同源性分别为98.0%,58.8%和90.5%。构建含ORF5基因的重组腺病毒穿梭质粒,PmeI酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经PacI酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒。通过PCR鉴定重组腺病毒含有ORF5基因,Western blot检测的结果表明PRRSV ORF5基因在293A细胞内获得表达。

关 键 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 重组腺病毒 

分 类 号：S852.6[农业科学—基础兽医学]