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作 者:夏佑林[1,2] 吴季辉[1,2] 光寿红 刘琴[1,2] 张海阳[1,2] 粱山 施蕴渝
机构地区:[1]中国科学技术大学生命科学学院 [2]中国科学院中国科学技术大学结构生物学实验室
出 处:《生物物理学报》1998年第3期391-400,共10页Acta Biophysica Sinica
基 金:安徽省自然科学基金
摘 要:金属蛋白由于其所带金属离子具有未配对电子而具有顺磁性,致使弛豫时间缩短、谱线加宽(~50Hz)以及谱范围变大(~100ppm),因而具有与抗磁蛋白不同的谱特征。这时一些常用的2DNMR实验方法将失效。本文探索顺磁金属蛋白的几种NMR实验方法,如溶剂峰抑制、2DMCOSY、NOESY、1DNOE差谱及SUPERWEFT等,并精心设计实验条件使之适用于顺磁金属蛋白的结构研究。这些实验方法成功地应用于紫色震颤菌血红蛋白(met-VtHb-CN)。通过这些实验找到了与血红素Fe3+配位的组氨酸,并完成了该金属蛋白的顺磁位移的共振峰的识别、活性中心质子间距离的测量、抗磁性化学位移及电离常数pKa值的确定。
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