条斑紫菜锰超氧化物歧化酶原核表达及多克隆抗体制备  

Expression and Polyclonal Antibody Preparation of Prokaryotic Recombinant Manganese Superoxide Dismutase (Mn SOD) fromPorphyra yezoensisUeda

作　　者：邵林[1] 茅云翔[1] 阎斌伦[2] 孔凡娜[1] 王健[1] 

机构地区：[1]中国海洋大学海洋生命学院,山东青岛266003 [2]淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室,江苏连云港222005

出　　处：《中国海洋大学学报（自然科学版）》2010年第4期47-52,共6页Periodical of Ocean University of China

基　　金：国家高技术研究发展计划项目(2006AA10A402;2006AA10A413);国家自然科学基金项目(30972247);教育部新世纪人才支持计划(NCET-06-0596);教育部科学技术研究重点项目(107070);江苏省海洋生物技术重点建设实验室开放课题资助

摘　　要：研究紫菜抗逆的分子机制,将本实验室克隆的条斑紫菜(Porphyra yezoensisUeda)锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,Mn SOD)基因全长cDNA克隆到质粒pET-30c(+)中,构建原核表达载体pET-S,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达Mn SOD,表达产物的分子量约为30 KDa。利用不同浓度的Mn2+诱导重组Mn SOD的表达,可以检测到比活力随Mn2+浓度增高而上升的趋势。用重组Mn SOD免疫新西兰大白兔,制备了多克隆抗体,多克隆抗体的效价为1∶8 000。免疫印迹实验(Western Blot)表明该多克隆抗体具有很好的特异性。A cDNA corresponding to manganese superoxide dismutase（SOD;EC 1.15.1.1.） fromPor-phyra yezoensisUeda was overexpressed in theEscherichia coliBL21（DE3） using the expression vector pET-30c（＋） and the molecular weight of the recombinant MnSOD is about 30 KDa.With the concentra-tion of Mn2＋increasing,the activity of the recombinant MnSOD is enhanced by inducement of Mn2＋.The recombinant Mn SOD was used to generate a polyclonal antibody in New Zealand white rabbits that recog-nized Mn SOD and the value is 1∶8 000.The western blot shows the polyclonal antibody can be used ef-fectively.

关 键 词：条斑紫菜 锰超氧化物歧化酶(Mn SOD) 原核表达 酶活性 多克隆抗体 

分 类 号：Q942[生物学—植物学] Q949.292.1