兔出血症病毒衣壳蛋白VP60在杆状病毒表达系统中的表达及细胞内定位  

Expression and localization analysis of VP60 protein of Rabbit hemorrhagic disease virus in insect cells-baculovirus expression system

作　　者：陈柳[1] 云涛[1] 刘光清[1] 倪征[1] 余斌[1] 宋毅[1,2] 

机构地区：[1]浙江省农业科学院农业部病毒学与生物技术重点实验室,浙江杭州310021 [2]浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华321004

出　　处：《浙江农业学报》2010年第2期135-139,共5页Acta Agriculturae Zhejiangensis

基　　金：国家自然科学基金项目(30800045);浙江省农业科学院与中国科学院合作项目(2008R21Y03E01);浙江省自然科学基金项目(Y3090137)

摘　　要：为了探讨兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白的细胞内定位,利用杆状病毒表达系统构建了表达RHDV结构蛋白(VP60)的重组杆状病毒。间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测以及电子显微镜观察结果表明,VP60不仅能在昆虫细胞中正确表达,而且能自组装形成病毒样颗粒(VLPs)。进一步对表达蛋白进行细胞内定位观察发现,表达蛋白定位于Sf9细胞的细胞膜上。A recombinant baculovirus expressing VP60 of Rabbit hemorrhagic disease virus （RHDV） was constructed with bac-to-bac baculovirus expression system to study the expression and intracellular localization of the structural protein VP60 of RHDV in Sf9 cells. The results of indirect immnuofluorescence assay （IFA） and Western blot analysis showed that the proteins were successfully expressed in Sf9 cells. The results of electron micrographs showed that there were some virus-like particles （VLPs） formed in Sf9 cells, and further results of eonfocal microscopy indi- cated that VP60 proteins were localized at the cellular membrane of Sf9 ceils.

关 键 词：兔出血症病毒 结构蛋白 昆虫—杆状病毒表达系统 细胞内定位 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]