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作 者:温立斌[1] 何孔旺[1] 杨汉春[2] 郭容利[1] 钟书霖[1] 周俊明[1] 李成仁[1] 陈梦海[3]
机构地区:[1]江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014 [2]中国农业大学动物医学院,北京100094 [3]扬州大学生物科学与技术学院,江苏扬州225009
出 处:《江苏农业学报》2010年第2期315-319,共5页Jiangsu Journal of Agricultural Sciences
基 金:国家自然科学基金项目(30972184);国家“973”计划前期研究专项项目(2007CB116308);江苏省自然科学基金项目(BK2008351)
摘 要:为评价高分辨熔点曲线分析在快速鉴别类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型中的应用。在Cor-bett Rotor-Gene 6000定量PCR仪上,利用EvaGreen荧光染料对靶核苷酸序列进行扩增,建立HRM分析P1和PCV2的工作流程。在优化各种条件基础上,利用HRM分析可区分相差1个碱基的靶序列。因此,HRM分析可为P1和PCV2的分子诊断提供一种新的技术手段。To assess the use of high-resolution melting(HRM) analysis for rapid identification of porcine circovirus-like agent P1 and porcine circovirus type 2(PCV2),the targeted DNA sequence was amplified by Corbett Rotor-Gene 6000 real-time PCR cycler in the presence of the EvaGreen fluorescent dye.A working protocol of HRM analysis were established.Under the optimized assay conditions,P1 and PCV2 were amplified and two HRM types were differed by only 1 bp.This assay provides a new approach for P1 and PCV2 detection using a new molecular diagnostic method.
关 键 词:高分辨熔点曲线 类猪圆环病毒因子P1 猪圆环病毒2型 鉴别
分 类 号:S852.659.2[农业科学—基础兽医学]
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