猪γ干扰素的表达及其抗病毒活性的安全检测  

Expression of porcine interferon-γ and its safe antiviral assay

作　　者：贺番[1,2] 孙元[1] 葛金英[1] 李淼[1] 常天明[1] 步志高[1] 仇华吉[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001 [2]内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特010018

出　　处：《生物工程学报》2010年第4期439-447,共9页Chinese Journal of Biotechnology

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2005CB523202)资助~~

摘　　要：为了提高干扰素抗病毒活性测定的生物安全性,本研究使用含有GFP的复制缺陷型水疱性口炎病毒(VSV△G*G)为指示病毒,分别对经原核表达系统和杆状病毒表达系统表达的重组猪γ干扰素(PoIFN-γ)在MDBK细胞上进行抗病毒活性测定。结果显示:由杆状病毒表达的重组PoIFN-γ具有高度抗病毒活性,其抗病毒活性为105IU/mL,原核表达的重组PoIFN-γ纯化后经缓慢复性也会产生一定的抗病毒活性,其抗病毒活性为32IU/mL。该方法与利用表达GFP的重组水疱性口炎病毒(VSV*GFP)所检测的干扰素抗病毒活性结果完全一致,表明复制缺陷型病毒VSV△G*G可作为复制型重组病毒的替代品,使得干扰素抗病毒活性检测更加安全、准确。In order to ensure the biosafty of the IFN-γ antiviral activity assay, we used a replication-deficient VSV carrying GFP as an interferon sensitive indicator virus （VSV△G＊G）. The antiviral activities of porcine IFN-γ expressed in Escherichia coli and in baculovirus on MDBK cells were assessed. The results showed that the antiviral activity of porcine IFN-γ expressed in baculovirus could reach 105 IU/mL, while the porcine IFN-γ expressed in E. coli showed some antiviral activity （32 IU/mL） after refolding. The results of the VSV△G＊G-based antiviral assay were almost identical to that of the VSV＊GFP-based assay, suggesting it is highly feasible to use VSV△G＊G as a substitute for VSV＊GFP, making assays for IFN-γ antiviral activity safer and more accurate.

关 键 词：猪Γ干扰素 杆状病毒 抗病毒活性检测 

分 类 号：S858.28[农业科学—临床兽医学]