检索规则说明:AND代表“并且”;OR代表“或者”;NOT代表“不包含”;(注意必须大写,运算符两边需空一格)
检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:黄晶晶[1] 常菊花[2] 陈楚芹[3] 沈晋良[2] 沈文飚[1]
机构地区:[1]南京农业大学生命科学学院,江苏南京210095 [2]南京农业大学植物保护学院,江苏南京210095 [3]南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095
出 处:《江苏农业科学》2010年第2期26-29,共4页Jiangsu Agricultural Sciences
基 金:农业部高毒农药替代试验示范项目[编号:(2005)种植业(植保)函7号]
摘 要:通过RT-PCR扩增出棉铃虫中肠钙黏蛋白毒素结合区编码基因片段Cad-tb,将其克隆到pET-30a原核表达载体中,并在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,获得融合表达的包涵体,经过变性、Ni-NTA柱亲和纯化、复性等方法处理包涵体,获得可溶性纯化蛋白,用纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,利用ELISA检测其效价。结果显示,以pET-30a-Cad-tb表达载体转化BL21菌后,经IPTG诱导成功获得分子量为37 ku左右的重组蛋白,单抗-His的Western blot鉴定其正确表达。纯化后的蛋白成功免疫新西兰大白兔,获得了该蛋白的多克隆抗体,ELISA检测其效价高于1∶16 000。
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