棉铃虫中肠钙黏蛋白Cry1A结合区编码基因的原核表达及多克隆抗体制备  

在线阅读下载全文

作  者:黄晶晶[1] 常菊花[2] 陈楚芹[3] 沈晋良[2] 沈文飚[1] 

机构地区:[1]南京农业大学生命科学学院,江苏南京210095 [2]南京农业大学植物保护学院,江苏南京210095 [3]南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095

出  处:《江苏农业科学》2010年第2期26-29,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基  金:农业部高毒农药替代试验示范项目[编号:(2005)种植业(植保)函7号]

摘  要:通过RT-PCR扩增出棉铃虫中肠钙黏蛋白毒素结合区编码基因片段Cad-tb,将其克隆到pET-30a原核表达载体中,并在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,获得融合表达的包涵体,经过变性、Ni-NTA柱亲和纯化、复性等方法处理包涵体,获得可溶性纯化蛋白,用纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,利用ELISA检测其效价。结果显示,以pET-30a-Cad-tb表达载体转化BL21菌后,经IPTG诱导成功获得分子量为37 ku左右的重组蛋白,单抗-His的Western blot鉴定其正确表达。纯化后的蛋白成功免疫新西兰大白兔,获得了该蛋白的多克隆抗体,ELISA检测其效价高于1∶16 000。

关 键 词:棉铃虫 钙黏蛋白 原核表达 多克隆抗体 

分 类 号:Q966[生物学—昆虫学]

 

参考文献:

正在载入数据...

 

二级参考文献:

正在载入数据...

 

耦合文献:

正在载入数据...

 

引证文献:

正在载入数据...

 

二级引证文献:

正在载入数据...

 

同被引文献:

正在载入数据...

 

相关期刊文献:

正在载入数据...

相关的主题
相关的作者对象
相关的机构对象