pCAGGs-miR-483重组质粒构建及miR-483转基因小鼠模型的建立  被引量:4

Constuction of PCAGGs-miR-483 Plasmid and Establishment of a MiR-483 Transgenic Mouse Model

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作  者:马宁[1] 王曦迪[1] 乔瑜[1] 李福源[1] 杨宝峰[2] 吕延杰[2] 单宏丽[2] 郑晓飞[3] 高旭[1] 

机构地区:[1]哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,哈尔滨150086 [2]哈尔滨医科大学药学院药理学教研室,哈尔滨150086 [3]北京放射与辐射医学研究所,北京100850

出  处:《中国生物化学与分子生物学报》2010年第5期478-483,共6页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基  金:黑龙江省教育厅海外学人科研资助项目(No.1152hz24);黑龙江省留学归国人员基金项目(No.LC06C21)~~

摘  要:miR-483是近年发现的一种编码于胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,Igf2)基因第2内含子的microRNA.研究表明,高脂饮食诱导的肥胖动物的心脏、肝脏及肝、肾肿瘤组织中miR-483表达异常,但其生物学功能尚待研究.建立稳定表达miR-483并能够传代的miR-483转基因小鼠是研究其功能的重要环节.利用特异miR-483克隆引物,以小鼠基因组为模版,经PCR获得pre-miR-483片段,通过重组构建pCAGG-miR-483重组质粒.该质粒可在真核细胞中稳定表达成熟miR-483.再利用原核显微注射法建立miR-483过表达转基因小鼠.利用实时PCR检测各组织miR-483含量.结果显示,miR-483转基因小鼠心肌、骨骼肌、肝脏等组织可过表达成熟miR-483.此外,miR-483转基因过表达小鼠较野生型小鼠体重降低,提示miR-483可能在发育、代谢等方面具有调节作用.miR-483转基因小鼠模型的建立为microRNA功能研究提供了在体研究的平台.

关 键 词:内含子microRNA 转基因小鼠 宿主基因 

分 类 号:Q78[生物学—分子生物学]

 

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