仙台病毒F基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达及抗原性分析  

Expression and antigencity analysis of Sendai virus F gene in baculovirus system

作　　者：曲连东[1,2] 蒋良丰[1] 刘家森[1,2] 司昌德[1] 郭东春[1] 姜骞[1] 林欢[1] 韩凌霞[1] 刘娣 

机构地区：[1]黑龙江省农业科学院博士后工作站,黑龙江哈尔滨150001 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001

出　　处：《中国预防兽医学报》2010年第5期347-350,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：国家科技基础平台工作专项(2003DIA75033)

摘　　要：为真核表达仙台病毒(SeV)融合蛋白(F)基因,本研究根据GenBank登录的SeV F基因序列设计合成一对特异性引物,以pMD18-T-F阳性重组质粒为模板扩增F基因,并将其克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac HTa中,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞DH10Bac,提取重组杆粒rBacmid-F,经PCR鉴定正确将rBacmid-F转染Sf9细胞,连续传代后,细胞病变明显。经SDS-PAGE分析,成功表达了相对分子量为65ku左右的F蛋白,western blot和ELISA分析表明重组F蛋白具有良好的抗原性。The fusion（F） gene sequences of Sendai virus（SeV） was amplified by PCR using a pair of specific primers designed according to the sequence in GenBank.The PCR product was cloned into pFastBacTM HTa vector and transferred into DH10Bac cells.Recombinant Bacmid-F was transfected into Sf9 cells,and a fusion protein about 65 ku was expressed and identified by SDS-PAGE analysis.The antigenicity of the recombinant F protein was confirmed by western blot and ELISA.

关 键 词：仙台病毒 F基因 重组杆状病毒表达系统 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]