缺失PRD的人FOXP3单克隆抗体的制备与鉴定  

作　　者：黄莺[1] 倪爱民[2] 陈勋[1] 许逊[1] 季宝菊[1] 王胜军[1] 许化溪[1] 邵启祥[1] 

机构地区：[1]江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学与免疫学检验系检验医学研究所,江苏镇江212013 [2]江苏大学生命科学院研究室,江苏镇江212013

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2010年第6期566-568,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30671984);江苏大学科技创新团队资助项目(2008-018-02)

摘　　要：目的:制备抗脯氨酸富含区缺失的人FOXP3(△PRD-hFOXP3)的单克隆抗体(mAb),为进一步研究人FOXP3各片段功能奠定基础。方法:以纯化的△PRD-hFOXP3重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,经筛选及克隆化建立2株分泌抗△PRD-hFOXP3的mAb杂交瘤细胞株;利用核型分析、间接ELISA及Western blot分别鉴定了杂交瘤的细胞核型、抗体的效价与特异性。结果:筛选到2株可稳定分泌抗△PRD-hFOXP3的mAb的细胞株,分别命名为1A2和3A11;2株抗体均为IgG1,腹水经ELISA方法测定效价均可达1∶105;Western blot显示这2株杂交瘤分泌的mAb均可与△PRD-hFOXP3蛋白特异性地结合。结论:成功获得2株能稳定分泌特异性抗△PRD-hFOXP3的mAb的杂交瘤细胞株,可用于人FOXP3的进一步研究及相关试剂的研发等。

关 键 词：△PRD-hFOXP3蛋白 杂交瘤细胞株 单克隆抗体 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]