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作 者:王海军[1] 王艳芳[1] 江莺[1] 赵文杰[1] 任艳[1] 马吉胜[1]
机构地区:[1]吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林长春130118
出 处:《黑龙江医药》2010年第3期328-331,共4页Heilongjiang Medicine journal
基 金:吉林农业大学博士启动基金项目
摘 要:目的:构建人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的卵清蛋白分泌表达载体,为建立鸡输卵管生物反应器奠定基础。方法:利用PCR手段,从鸡基因组DNA克隆了4.1k(-4050bp~+42bp)卵清蛋白(ovalbumin)上游调控序列,利用重叠PCR技术,将溶菌酶信号肽(lysozyme signal peptide)基因与人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因融合在一起。结果:经DNA测序和核酸电泳检测,OV启动子基因序列、pcsbFGF和pcOV-sbFGF电泳位点与预计结果一致。结论:人bFGF的卵清蛋白分泌表达载体构建初步完成,可进行进一步转染表达。Objective: To construct a ovalbumin secreted vector for human basic fibroblast growth factor (bFGF), that will be used in Chicken Oviduct Bioreactor. Methods: We obtain 4.1k (-4050bp - +42 bp) ovalbumin upstream regulatory sequence from chicken genomic DNA using PCR method, and joint the chicken lysozyme signal peptide gene and human hFGF gene together using overlap PCR technology. Results: By DNA sequencing and Nucleic Acid Electro- phoresis assay, the OV promoter, pcsbFGF and pcOV-sbFGF have the same results of their design sequence respectively. Conclusions: The ovalbumin secreted vector for human bFGF construction is completed preliminary, and next it will be used for the secretion of bFGF in Chicken Oviduct Bioreaetor.
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