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作 者:楼叶江[1] 潘晓蓉[1] 贾培敏[1] 张长林[1] 许桂平[1] 李冬[2] 童建华[1]
机构地区:[1]上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,200025 [2]同济大学附属同济医院检验科
出 处:《中华医学遗传学杂志》2010年第3期255-258,共4页Chinese Journal of Medical Genetics
基 金:国家自然科学基金(30971275,30670882);国家863计划(2006AA02Z19A);上海交通大学医学院博士创新基金项目;上海市人才发展基金(020)
摘 要:目的 深入研究维甲酸诱导基因G(retinoic acid-induced gene G,RIG-G)启动子上所含的干扰素刺激反应元件(interferon-stimulated response elements,ISRE)对RIG-G基因表达的调控作用.方法 根据RIG-G基因启动子所包含的ISRE序列,利用定点突变技术分别构建野生型和位点突变型的报告基因质粒,然后采用报告基因转染实验检测RIG-G基因启动子中ISRE序列的功能活性.结果 研究发现单独突变RIG-G基因启动子上的ISRE Ⅱ元件不影响报告基因的表达,而单独突变ISRE Ⅰ则会对报告基因的表达产生明显的抑制作用;同时突变ISRE Ⅰ和ISRE Ⅱ元件则会使报告基因完全失去对转录因子的反应性.结论 RIG-G基因启动子所包含的ISRE Ⅰ和ISRE Ⅱ元件是诱导该基因表达的转录因子复合物的作用位点,是该基因表达的分子基础,且ISRE Ⅰ元件的作用要优先于ISRE Ⅱ.Objective To study the regulatory role of interferon-stimulated response elements (ISREs) located on the retinoic acid-induced gene G (RIG-G) promoter in RIG-G expression. Methods By using point mutation technique, the authors constructed the wide type and site-mutant reporter gene plasmids according to the ISRE sequence on RIG-G promoter, and detected the functional activities by luciferase reporter assay. Results Mutation in ISRE Ⅱ alone had no obvious effect on the expression of the reporter gene, whereas mutation in ISRE Ⅰ dramatically inhibited the transactivity of RIG-G promoter. Mutation in both ISRE Ⅰ and ISRE Ⅱ resulted in complete loss of its response to the transcription factors for the reporter gene. Conclusion Both ISRE Ⅰ and ISRE Ⅱ on the RIG-G promoter are the binding sites for the complex of transcription factors. They are required for RIG-G expression, and ISRE Ⅰ has a preferential role over ISRE Ⅱ .
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