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作 者:张建华[1] 陈红[1] 张秀芹[2] 许晓群[1] 王宝红[3] 高春义[1] 王郡甫[1]
机构地区:[1]山东省医学科学院基础医学研究所、山东省现代医用药物与技术重点实验室,山东济南250062 [2]山东省医学科学院药物所, 山东济南250062 [3]临沂市中医医院骨科, 山东临沂276002
出 处:《免疫学杂志》2010年第6期527-530,共4页Immunological Journal
基 金:山东省自然科学基金(ZR2009CM036);国家自然科学基金项目(30371302);山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(2005BS03015)
摘 要:目的:建立苏木素染色测定免疫效应细胞介导的细胞毒效应的方法:。方法:采用苏木素染色法观察人贴壁肿瘤细胞系Hep2的增殖活性,测定了人NK细胞系NK92、NKL和YT对SGC7901、Hep2细胞的细胞毒效应,新西兰白兔CTL细胞对VX2细胞的细胞毒效应。同时与MTT比色法及CCK-8比色法进行比较。结果:NK92、NKL和YT三种效应细胞对SGC7901和Hep2细胞杀伤6h或16h后,在效靶比分别为10:1、5:1、2.5:1和1.25:1时,三种方法:所测结果:均具有良好的效靶关系,且杀伤趋势基本一致。6次苏木素染色法测定NK92对SGC7901和Hep2细胞的细胞毒效应结果:显示CV<8%,MTT比色法测定结果:CV<12%,前者具有更好的重复性。苏木素染色法和MTT比色法所测兔CTL杀伤效应结果:一致,线性关系明显。结论:苏木素染色法用于免疫效应细胞对贴壁肿瘤细胞系的细胞毒效应测定,具有特异、稳定、简便、经济等优点。The aim is to establish Hematoxylin stain method for determination of cell-mediated cytotoxicity. Hematoxylin was employed to test proliferation of adherent Hep2 cells, cytotoxicity of human NK cell-lines against SGC7901 or Hep2 cells, and cytotoxicity of New Zealand white rabbit CTL against VX2 cells. We found that there was correlation between NK cell line cytotoxicity and effect-target cell ratio (E/T) within 10:1 to 1.25:1. Repeatability of Hematoxylin stain method exceeded that of MTT method. In rabbit CTL cytotoxicity assay, results from Hematoxylin stain method were consistent with that from MTT method. All theses results come to that Hematoxylin stain method is a specific, stable and cheap assay for determination of cell-mediated cytotoxicity of adherent cells.
关 键 词:苏木素染色法 细胞介导的细胞毒效应测定 NK细胞系
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