SHP-2蛋白NSH2结构域的原核表达和同位素标记  

Expression and Isotope Labeling of NSH2 Domain of SHP-2 Protein

作　　者：牛皋[1] 郭江峰[1] 高晓莲[2] 张耀洲[1] 

机构地区：[1]浙江理工大学生命科学学院,杭州310018 [2]美国休斯敦大学生化系,休斯敦tx770045001

出　　处：《浙江理工大学学报（自然科学版）》2010年第4期630-635,共6页Journal of Zhejiang Sci-Tech University(Natural Sciences)

基　　金：国家973计划课题(2005CB121006);国家863计划课题(2007AA021703);浙江省自然科学基金(Y3080183);863重点项目(2007AA100504);浙江省钱江人才计划项目(QJD0702014)

摘　　要：SHP-2蛋白是一种含有两个SH2结构域的磷酸酶。SHP-2的N端SH2结构域是细胞因子或病毒因子激活该蛋白的分子内靶点。对shp2基因进行信息学分析,设计引物通过PCR克隆出人SHP-2蛋白N端SH2结构域(NSH2)的DNA序列。重组到原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功高效率表达了可溶性NSH2蛋白。对蛋白进行15N同位素标记和纯化,并浓缩获得达到进行核磁滴定法结构研究的蛋白样品。SHP-2 protein is a phosphatase which has two SH2 domains（NSH2 and CSH2）.The N terminal SH2 domain（NSH2） is a target of some cytokines and virokines.In this work,the shp-2 gene is analyzed in bio-information methods.The N terminal s h2 sequence is obtained by PCR and recombinated into a prokaryotic expression vector,pGEX-2T.Then it is transformed into E.coli BL21（DE3） for prokaryotic expressions.The NSH2 protein is expressed in high quality and in a large quantity.It is labeled with 15N isotope and purified to a high purity.

关 键 词：SHP-2 SH2结构域 同位素标记 HSQC 

分 类 号：Q71[生物学—分子生物学]