尿激酶原-RGDS双功能分子——构建、表达及性质研究  

作　　者：钱斌[1] 孙迎庆[1] 郭雁[1] 党昕[1] 茹炳根[1] 

机构地区：[1]北京大学蛋白质工程国家重点实验室

出　　处：《中国科学（C辑）》1999年第2期125-131,共7页Science in China(Series C)

摘　　要：利用定点突变及DNA重组技术 ,构建了在尿激酶原K区C 端的β 发夹区插入了精氨酸 甘氨酸 天冬氨酸 丝氨酸 (RGDS)片段的尿激酶原嵌合体基因 ,并利用昆虫杆状病毒表达系统通过感染Sf9细胞对嵌合体尿激酶原进行了高效表达 .用尿激酶原单抗亲和柱纯化表达产物 ,获得初步纯化的嵌合体蛋白 .对嵌合体蛋白进行血小板膜结合实验表明 ,此嵌合体具有依赖于钙离子的结合活化血小板膜的活性 .用生色底物Chromozym U测定嵌合体的酰胺解活性 ,结果显示 ,纤溶酶激活后的嵌合体比活为 62 0 0 0IU/mg,与文献报道的纤溶酶激活的尿激酶原比活 65 3 5 5IU/mg相近 .纤溶酶激活后的嵌合体激活纤溶酶原的反应符合米氏方程 ,其Km 值为 0 .97μmol/L ,与天然尿激酶的Km 值 1.64μmol/L相近 .嵌合体还显示了较强的体外抑制血小板聚集活性 .这些结果表明 ,此尿激酶原 RGDS嵌合体有可能成为一种新的双功能溶栓药物 .

关 键 词：尿激酶原 RGDS 双功能蛋白 心血管疾病 溶栓药物 

分 类 号：R973.2[医药卫生—药品] TQ464.8[医药卫生—药学]