猪附红细胞体MSG1蛋白的表达和多克隆抗体的制备  

作　　者：缪芬芳[1] 刘明亚[1] 李玉峰[1] 陈闻[1] 许家荣[1] 王先炜[1] 姜平[1] 

机构地区：[1]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095

出　　处：《畜牧与兽医》2010年第5期59-61,共3页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：公益性行业(农业)科研专项项目(200903036-10)

摘　　要：本研究将附红细胞体的MSG1蛋白基因按大肠杆菌密码子偏嗜性改造后进行全基因人工合成,合成的基因连接入pBAD/HisB载体后导入大肠杆菌Top10感受态细胞中,进行MSG1诱导表达,确定诱导表达的最佳时间和最佳诱导剂浓度。对表达的蛋白应用His单抗进行了特异性鉴定,对鉴定后的蛋白应用Ni-NTA纯化试剂进行了不同条件下的蛋白纯化。试验结果表明,诱导蛋白的分子量在45 ku左右,加入0.2%的L-阿拉伯糖,诱导2 h后所表达的蛋白量最高。经Western-blot鉴定,该蛋白可以被His单抗特异性识别,经纯化后可以得到较高纯度的MSG1蛋白。表达的MSG1蛋白经纯化后免疫家兔制备多克隆抗体,Western blot证明制备的抗体具有高度的特异性。MSG1蛋白的表达和多抗的制备可以为后续研究附红细胞体的吸附机制、致病机理,以及附红细胞体病的治疗等提供理论基础。

关 键 词：附红细胞体 MsG1表达 多克隆抗体制备 

分 类 号：S855[农业科学—临床兽医学]